Cell Counting Kit-8 简称 CCK8(或 WST-8)试剂盒,是一种基于 WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4- 硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)显色反应的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8 工作原理:在电子耦合试剂存在的条件下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在 450 nm 波长处测定 OD 值,间接反映活细胞数量。
WST-8 是 MTT 的一种升级替代产品,和 MTT 或其它 MTT 类似产品如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。首先,MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的甲臜不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而 WST-8、XTT 和 MTS 产生的甲臜都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8 产生的甲臜比 XTT 和 MTS 产生的甲臜更易溶解。再次,WST-8 比 XTT 和 MTS 更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-8 与 MTT、XTT 相比线性范围更宽,灵敏度更高。
CCK 法广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等方面。
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